HP001 菌落总数测试片

样品制备

取样品 25 g(mL) 放入含有 225 mL 磷酸盐缓冲液（或生理盐水）的无菌均质杯或均质袋内，均质器混匀 1 min～2 min 制成 1:10 的样品匀液，必要时用无菌 1 mol/L NaOH 或 1mol/L HCl 溶液调节样品匀液 pH 至 6.8～7.2。用 1mL无菌吸管或移液器吸取 1:10 均液 1 mL，注入含有 9 mL 稀释液的试管内，振摇后成为 1:100 的样品匀液，以此类推，制备 10 倍系列稀释的样品匀液，每次换一支吸管。

接种

根据对样品污染状况的估计，选择 2～3 个稀释度进行检测。将菌落总数检测片置于平坦实验台面，揭开上层膜，用无菌吸管吸取 1 mL 样品匀液滴加到检测片中央，缓缓盖上上层膜，避免产生气泡。静置 3～5min 使样液扩散并重新形成凝胶。

培养

将检测片正面向上水平放置 36℃±1℃，培养 48h±2h ，水产品 30℃±1℃，培养 72 h±3h。

判读

计数所有红色菌落不论大小和清晰度。合适的计数范围在 30 CFU～300CFU。若整个培养区域呈淡红色，可能是菌浓度过高，需对样品进一步稀释以获得确切的计数。如需分离菌落进行进一步分析，揭开上层膜用接种针将菌落挑出使用即可。