HP002 大肠菌群测试片

样品制备

取样品 25 g(mL) 放入含有 225 mL 磷酸缓冲液（或生理盐水）的无菌均 质杯或均质袋内，均质器混匀 1 min～2 min 制成 1:10 的样品匀液，必要时用 无菌 1 mol/L NaOH 或 1mol/L HCl 溶液调节样品匀液 pH 至 6.8～7.2。用 1mL 无菌吸管或移液器吸取 1:10 均液 1 mL，注入含有 9 mL 稀释液的试管内，振摇 后成为 1:100 的样品匀液，以此类推制备 10 倍系列稀释的样品匀液，每次换一 支吸管。

接种

根据对样品污染状况的估计，选择 2～3 个稀释度进行检测。将大肠杆菌/ 大肠菌群测试片置于平坦实验台面，揭开上层膜，用无菌吸管吸取 1 mL 样品 匀液滴加到测试片中央，缓缓盖上上层膜，避免产生气泡，静置 3～5min 使样 液扩散并重新形成凝胶。

培养

将测试片正面向上水平放置到培养箱中，36℃±1℃条件下培养 18h～24 h。

判读

计数所有黄色酸环，周围有气泡的红色菌落。合适的计数范围在 15 CFU～150 CFU。如菌浓度过高，整个培养区域都呈黄色且无法计数，需对样品进一 步稀释以获得准确的计数。如需分离菌落进行进一步分析，揭开上层膜用接种 针将菌落挑出即可。