HP007 金黄色葡萄球菌测试片

定性检验

取样品 25 g(mL) 放入含有 225 mL 7.5%氯化钠肉汤的无菌均质杯或均质 袋内，均质混匀 1 min～2 min 。36℃±1℃，培养 18h～24 h。

将金黄色葡萄球菌测试片置于平坦实验台面，揭开上层膜，用 1μL 或 10 μL 接种环取增菌液在凝胶上划线分离，用无菌吸管吸取 1 mL 无菌水或无菌 生理盐水滴加到测试片中央，缓缓盖上上层膜，避免产生气泡。静置 3~5min 使样液扩散并重新形成凝胶。

定量计数

取样品 25 g(mL) 放入含有 225 mL 磷酸缓冲液（或生理盐水）的无菌均 质杯或均质袋内，均质器混匀 1 min～2 min 制成 1:10 的样品匀液，必要时用 无菌 1 mol/L NaOH 或 1mol/L HCl 溶液调节样品匀液 pH 至 6.8～7.2。用 1mL 无菌吸管或移液器吸取 1:10 均液 1 mL，注入含有 9 mL 稀释液的试管内，振摇 后成为 1:100 的样品匀液，以此类推制备 10 倍系列稀释的样品匀液，每次换一 支吸管。

根据对样品污染状况的估计，选择 2～3 个稀释度进行检测。将金黄色葡萄球菌测试片置于平坦实验台面，揭开上层膜，用无菌吸管吸取 1 mL 样品匀 液滴加到测试片中央，缓缓盖上上层膜，避免产生气泡。静置 3～5min 使样液 扩散并重新形成凝胶。

培养

将测试片正面向上水平放置 36℃±1℃，培养 18h～24 h。

判读

疑似金黄色葡萄球菌为品红色菌落。合适的计数范围在 20 CFU～200 CFU。 若整个培养区域呈品红色可能是菌浓度过高，需对样品进一步稀释以获得确切 的计数。如需分离菌落进行进一步分析，揭开上层膜用接种针将菌落挑出使用 即可。