HP005 沙门氏菌测试片

样品制备

预增菌：无菌操作称取25g(mL)样品，置于盛有225mL BPW的无菌均质袋内，用 均质器均质1〜2min。若样品为液态，振荡混匀。必要时用无菌 1 mol/L NaOH 或 1 mol/L HCl溶液 调节样品匀液pH至 6.8±0.2 。于36°C±1°C培养8h〜18h。

增菌：轻摇培养过的样品混合物，取 1mL 转种于 10mL TTB内，于 42°C±1°C 培养 18h〜24h。同时另取 1mL 转种于 10mL SC内，于 42°C±1°C 培养18h~24h。

接种

将沙门氏菌测试片置于平坦实验台面，揭开上层膜，用 1μL 或 101μL 接种环沾取 1环 增菌液在凝胶上划线分离。无菌吸管或移液枪吸取 1mL 无菌水或无菌生理盐水滴加到测试片中央，缓缓盖上上层膜，避免产生气泡。静置3〜 5min使样液扩散并重新形成凝胶。

或用 1mL 无菌吸管或移液器吸取增菌液 1mL，注入含有 9mL 稀释液的试管内，振摇后成为 1:10 的样品匀液，以此类推制备 10倍系列稀释的样品匀液，每次换一支吸管。根据对样品污染状况的估计，选择2〜3个稀释度进行检测。将沙门氏菌测试片置于平坦实验台面，揭开上层膜，用无菌吸管吸取 1mL 样品匀液滴加到测试片中央，缓缓盖上上层膜避免产生气泡。静置3〜5min使 样液扩散并重新形成凝胶。

培养

将测试片正面向上水平放置36°C±1°C，培养24h±2h。

判读

疑似沙门氏菌为红色菌落黄色酸环，红色菌落有气泡，红色菌落有黄色酸环和气泡，其它杂菌为红色、深红和棕色菌落无黄色酸环、蓝绿色、蓝灰色菌落有或无黄色酸环。若整个培养区域呈淡红色或蓝绿色，可能是菌浓度过高， 需对样品进一步稀释以获得确切的计数。如需分离菌落进行进一步分析，揭开上层膜用接种针将菌落挑出使用即可。