HKE376NLS-Cas9(D10A)Nickase

CRISPR/Cas9是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御系统，改造后的II型CRISPR/Cas9系统在基因的定点修饰中展现出巨大的应用潜能。脱靶效应是目前CRISPR/Cas9技术应用的一个难题，在基因编辑应用中，可能会出现难以预测的后果。本制品为spCas9Nuclease的一个突变体。Cas9Nuclease具有两个切割活性中心，从而实现在sgRNA靶序列特定位点引入DNA双链断裂（DSB）。NLS-Cas9（D10A）Nickase在Cas9Nuclease基础上突变其中一个切割活性中心，其能在与sgRNA靶序列互补的DNA链上产生切口，从而形成功能性的单链断裂，并且通过在蛋白两端加了核定位序列(NLS),可把蛋白送到细胞核内进行基因组编辑，配合一对gRNA使用，可实现Cas9Nuclease相同的基因编辑效果，由于有效的识别序列由20bp增加至40bp，可明显减少意外的脱靶基因修饰，从而显著提高CRISPR/Cas9技术基因修饰的特异性。