HKE242ANGSmRNAMagneticIsolationKit

HKE242ANGSmRNAMagneticIsolationKit的操作步骤

冰盒、0.2ml磁力架、0.2ml/1.5mlNuclease-free管、65℃水浴锅、PCR仪等实验前准备材料。
1、将Oligo-dT25MagBeads从4℃取出，静置使其温度平衡至室温（约30min）。
2、将磁珠充分混匀，吸取15μl到Nuclease-freePCR管中，置于磁力架中，室温静置30s，小心移除上清。
3、加入100μl2×BindingBuffer洗涤磁珠，轻轻混匀，置于磁力架中，室温静置1min，小心移除上清。
4、重复步骤3。
5、加入50μl2×BindingBuffer重悬磁珠。
6、在一个Nuclease-freePCR管中，用RNasefreewater将0.1-5μg总RNA稀释至50μl，65℃温育5min。
7、立即将步骤5中的悬浮液加入到步骤6的RNA中，轻轻混匀，室温静置10min以上，使其温度降至室温。（此步骤mRNA与磁珠结合）
8、将样品置于磁力架中，室温静置2min，小心移除上清。
9、加入200μlWashBuffer，轻轻混匀，将样品重新放回至磁力架中，室温静置1min，小心移除上清。
10、重复步骤9两次，最后吸除全部上清。注：最后需要用10μl移液器吸干净残留液体。
11、加入21μlElutionBuffer，混匀后将样品放入PCR仪中，80℃，2min；待温度降至25℃后取出，立即置于磁力架中，室温静置2min，收集20μl上清。（此步骤mRNA与磁珠分离）注：样品可置于冰上继续进行NGS文库构建或其他分析应用，也可以置于-80℃保存。

HKE242ANGSmRNAMagneticIsolationKit的产品特点

1、本试剂盒根据磁珠法提取mRNA，操作简便，无需离心。
2、分离出的mRNA最后用少量洗脱缓冲液溶解，可直接进行后续实验，无需再经RNA沉淀纯化。
3、本试剂盒可适用于（10ng-5μg）RNA样本，mRNA回收产率为总RNA含量的1％-2％。
4、本试剂盒可在30分钟内从总RNA中获得完整的mRNA，省时高效。

HKE242ANGSmRNAMagneticIsolationKit的使用注意事项

1）磁珠需置于4℃保存。
2）磁珠使用前务必要回温至室温，并充分混匀，否则可能影响样品的回收效率。
3）操作过程严格保证无RNase和核酸污染。
4）为获得好的纯化效果，提取的总RNA完整度应良好，确保RIN值在7.0及以上。