环状连接酶

环状连接酶的产品特点

可在标准反应条件下，高效催化长度为15-200nt的ssDNA/ssRNA发生链内环化；
可催化单链底物与5'磷酸化/腺苷酸化的单链DNA接头连接。

环状连接酶的产品用途

1)产生环状的单链DNA分子，用于滚环复制或者滚环转录的实验研究。
2)用于cfDNA/ctDNA测序，甲基化测序等。

环状连接酶的检测方法

1）连接产物经20%聚丙烯酰胺/8M尿素的PAGE胶检测，线性DNA分子的迁移速度较环状DNA分子快。
2）加入核酸外切酶I(ExoI)，37℃反应45min，线性DNA被完全消化，而环状单链DNA分子不受外切酶的影响。ExonucleaseI，能够从ssDNA的3'-OH末端分解生成5'-单核苷酸，对ssDNA具有较高的特异性，不分解双链DNA及RNA。