水生动物病原DNARNA提取试剂盒（硅胶膜吸附柱法）

水生动物病原DNARNA提取试剂盒（硅胶膜吸附柱法）的储存条件及有效期

室温保存，有效期一年，2~8℃条件下储存更佳，储存过程中若溶液产生沉淀，使用前将其在室温放置一段时间或37℃条件下温育，待充分溶解后摇匀即可使用。蛋白酶K于2~8℃储存（-20℃长期保存）。

水生动物病原DNARNA提取试剂盒（硅胶膜吸附柱法）的使用方法

初次使用前请确保去蛋白缓冲液和漂洗液中已按说明加入指定量的无水乙醇。1、取适量的待检水生动物组织样品加入1～5倍体积的生理盐水进行匀浆。
2、取200μL匀浆液至1.5mL离心管中，加入500μL裂解液、20μL蛋白酶K，涡旋振荡混匀，65℃孵育15min。
3、12000rpm离心2min，小心吸取400μL上清液至一个新的1.5mL离心管中，加入250μL无水乙醇，涡旋振荡混匀，室温静置3min。
4、将上一步的全部液体加入到硅胶膜吸附柱上（吸附柱套入收集管中），12000rpm离心1min，倒掉滤液，吸附柱套回收集管。
5、加入500μL去蛋白缓冲液，12,000rpm离心1min，倒掉滤液，吸附柱套回收集管。（去蛋白缓冲液初次使用前加入16mL无水乙醇。）
6、加入500μL漂洗液，12,000rpm离心1min，倒掉滤液，吸附柱套回收集管。（漂洗液初次使用前加入60mL无水乙醇。）
7、重复步骤6。
8、再次12,000rpm离心2min，彻底去除吸附柱中残留的液体。将吸附柱套入新的1.5mL离心管中，打开盖子，室温放置2min，去除残留的乙醇。
9、向吸附柱中央处悬空滴加50~100μL洗脱液，室温静置5min，12,000rpm离心2min，离心所得液体即为待检病原核酸溶液。短期保存可置于-20℃，长期保存应置于-80℃。

水生动物病原DNARNA提取试剂盒（硅胶膜吸附柱法）的注意事项

1、实验前请仔细阅读本试剂盒说明书，严格按操作步骤执行。
2、本试剂盒提取所使用的一次性离心管和吸头应经过高压灭菌，且不含DNase和RNase。
3、裂解液中含有胍盐类蛋白变性剂，应避免直接接触皮肤，如有接触请用大量清水冲洗。
4、实验后妥善处理所有样本和试剂材料，彻底清洁和消毒操作台面。