用于各种细菌样本中纯化高纯度的DNA,其原理是利用裂解液裂解释放基因组DNA;随后利用蛋白酶K降解膜蛋白和缠绕DNA的核蛋白,使DNA充分游离;游离的DNA特异性地吸附到磁珠上,通过电磁进行捕获和转移并在深孔板中振荡进行杂质清除;最后洗脱液将DNA从磁珠上洗脱达到纯化目的。
规格 - TQ001D1细菌基因组DNA纯化试剂盒
编号 | 产品名称 | 规格 |
TQ001D1 | 细菌基因组 DNA 纯化试剂盒(磁珠法) | 16T/板×2 板 |
TQ001D1细菌基因组DNA纯化试剂盒的储存条件及有效期
2~8℃保存,有效期12个月,请在有效期内使用。
TQ001D1细菌基因组DNA纯化试剂盒的适用仪器
全自动核酸提取仪或工作站,部分产品可能因加热槽的位置可能存在不兼容,使用前请仔细阅读说明书或咨询售前。
TQ001D1细菌基因组DNA纯化试剂盒的使用方法
初次使用前请在去蛋白缓冲液和漂洗液中加入无水乙醇,参见瓶身标签或使用说明书。1,吸取1~2mL对数生长期细菌培养液于1.5mL离心管中。12,000r/min离心1min,尽量吸除上清。
2,对革兰氏阴性菌,向离心得到的菌体沉淀中加入200μL悬浮液,涡旋振荡至充分悬浮。3,对革兰氏阳性菌,需加入溶菌酶辅助破壁处理。具体方法为:向步骤1中收集的菌体沉淀加入120μL悬浮液,充分悬浮后加入80μL的溶菌酶,37℃水浴30min。
4,如需要去除RNA,可加入4μLRNaseA(100mg/mL)溶液,震荡混匀后,室温放置5min。5,加入20μL蛋白酶K,55℃水浴30min。
5,加入20μL蛋白酶K,55℃水浴30min。
6,从试剂盒中取出预装板后,颠倒数次使磁珠重悬混匀。手动拍甩预装板或使用板式离心机进行离心(500rpm离心1min),使试剂和磁珠集中到孔板底部。使用前小心撕去铝箔封口膜,防止液体溅出。
7,在96深孔板的第1列和第7列每孔中分别加入200μL样本(样本不足200μL时加入无酶水补至200μL)和30μL蛋白酶K,加样时尽量将移液枪头插入孔底,避免样液残留在板壁上。
8,将准备好的96深孔板放置在32通道核酸自动提取仪的深孔板底座上,并将8孔磁棒套插入磁棒套卡槽内。
9,自动化程序结束后,取出96深孔板,第5列及第11列的液体即为提取的核酸溶液,转移到干净的离心管中,置于-20℃保存(长期保存应置于-80℃)。
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