营养琼脂(NA)瓶装颗粒培养基

检验原理：蛋白胨和牛肉膏粉提供氮源、维生素、氨基酸和碳源;氯化钠能维持均衡的渗透压;琼脂是培养基的凝固剂。

使用方法：

1、称取本品33g，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min，备用。

2、(食品)以无菌操作称取检样25克(或25mL)，放入含有225mL灭菌生理盐水或其他稀释液的玻璃三角瓶中(瓶内预置适当数量的玻璃珠)，充分振摇，即为1：10的均匀稀释液。依次做1：100，1：1000……稀释液。

3、根据对样品污染情况的估计，选择2—3个合适的稀释度，分别在做10倍稀释的同时，吸取1mL稀释液于灭菌平皿中，每个稀释度做2个平皿。

4、稀释液移入平皿后应及时将凉至46℃左右的培养基注入平皿约15mL，并转动平皿使混合均匀，同时将营养琼脂培养基倾入加有1mL稀释液的灭菌平皿内作空白对照。待琼脂凝固后，倒置于36±1℃温箱中培养48±2h。

5、观察结果。

6、菌落计数方法：做平板菌落计数时，可用肉眼观察，必要时用放大镜检查，以防遗漏，在计下各平板的菌落数后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。

7、菌落计数的报告：选取菌落数在30—300之间的平板作为菌落总数测定标准。一个稀释度使用两个平板，应采用两个平板平均数，其中一个平板有较大片状菌落生长时，则不宜采用，而应以无片状菌落生长的平板作为该稀释度的菌落数，若片状菌落不到平板的一半，而其余一半中菌落分布又很均匀，即可计算半个平板后乘以2以代表全皿菌落数。平皿内如有我链状菌落生长时(菌落之间无明显界线)，若仅有一条链，可视为一个菌落;如有不同来源的几条链，则应将每条链视为一个菌落计。

储存条件及保质期：贮存于避光、阴凉干燥处;贮存期三年。

注意事项：

1、称量时注意粉尘，佩戴口罩操作以避免引起呼吸道系统不适。

2、自制平板时需注意培养基的厚度，厚度过薄容易造成琼脂水分保持性下降，开裂;因此，一般需要15-20mL(Φ90mm)体积培养基，平板培养基厚度至少为2mm。

3、质检报告可以登录环凯网站http://www.huankai.com，打开“客服中心”页面，输入产品批号下载。

废物处理：检测之后带菌平板置于121℃下高压灭菌30分钟后处理。

执行标准：Q/HKSJ 03 普通微生物培养基