细菌基因组 DNA 纯化试剂盒（磁珠法）

细菌基因组DNA纯化试剂盒（磁珠法）使用方法：初次使用前请在去蛋白缓冲液和漂洗液中加入无水乙醇，参见瓶身标签或使用说明书。

1，吸取1~2mL对数生长期细菌培养液于1.5mL离心管中。12,000r/min离心1min，尽量吸除上清。
2，对革兰氏阴性菌，向离心得到的菌体沉淀中加入200μL悬浮液，涡旋振荡至充分悬浮。
3，对革兰氏阳性菌，需加入溶菌酶辅助破壁处理。具体方法为：向步骤1中收集的菌体沉淀加入120μL悬浮液，充分悬浮后加入80μL的溶菌酶，37℃水浴30min。
4，如需要去除RNA，可加入4μLRNaseA（100mg/mL）溶液，震荡混匀后，室温放置5min。5，加入20μL蛋白酶K，55℃水浴30min。
5，加入20μL蛋白酶K，55℃水浴30min。
6，从试剂盒中取出预装板后，颠倒数次使磁珠重悬混匀。手动拍甩预装板或使用板式离心机进行离心（500rpm离心1min），使试剂和磁珠集中到孔板底部。使用前小心撕去铝箔封口膜，防止液体溅出。
7，在96深孔板的第1列和第7列每孔中分别加入200μL样本（样本不足200μL时加入无酶水补至200μL）和30μL蛋白酶K，加样时尽量将移液枪头插入孔底，避免样液残留在板壁上。
8，将准备好的96深孔板放置在32通道核酸自动提取仪的深孔板底座上，并将8孔磁棒套插入磁棒套卡槽内。
9，打开仪器操作软件，选择或设置核酸自动化提取程序。
10，自动化程序结束后，取出96深孔板，第5列及第11列的液体即为提取的核酸溶液，转移到干净的离心管中，置于-20℃保存（长期保存应置于-80℃）。