第一链cDNA合成预混液是以mRNA或者总RNA为模板,高效合成第一链cDNA。本产品含有反转录反应所需的全部试剂(IIReverseTranscriptase,RNaseInhibitor,Oligo(dT)18,RandomN6,dNTPs)。反应时只需要加入RNA模板和水即可,操作简单,降低操作过程中的污染。本制品含有去基因组成分gDNAPurge,以RNA为模板进行cDNA第一链合成时,可以同步去除基因组DNA污染,反应结束后,75℃加热5分钟,就可以失活反转录酶,RNA酶抑制剂。合成的第一链cDNA能直接用于PCR或荧光定量PCR的模板,第二链cDNA的合成或线性RNA扩增,也可用于需要用带有放射性或非放射性核苷酸标记第一链cDNA的实验。
规格 - PlusAll-in-one1stStrandcDNASynthesisSuperMix(gDNAPurge)
编号 | 产品名称 | 规格 | 产品介绍 | 产品价格 |
HKE047-01A | Plus All-in-one 1st Strand cDNA Synthesis SuperMix (gDNA Purge) | 50次(20μl体系) | 一体式第一链cDNA超级预混液(去除gDNA) | 645 |
PlusAll-in-one1stStrandcDNASynthesisSuperMix(gDNAPurge)的产品特点
本制品采用耐高温逆转录酶,大幅提高热稳定性和cDNA合成效率;
本制品中添加的IIReverseTranscriptase无RNaseH活性,可避免第一链cDNA合成过程中,RNA/DNA杂交模板链中RNA降解,保证cDNA合成的质量;
本制品中RandomN6和Oligo(dT)18引物比例经过优化,可均匀合成样品中的cDNA;
本制品中含有去基因组成分,反转录时可同步去除基因组DNA污染。
PlusAll-in-one1stStrandcDNASynthesisSuperMix(gDNAPurge)的注意事项
1)用DEPC处理实验用到的所有实验器材,或者购买已经证明无核酸酶的实验用具,实验过程戴手套并经常更换手套,避免RNA酶的污染。
2)确保所用试剂中无RNA酶污染。
3)试剂盒要严格密封保存。在反转录过程中,所有管子要确保扣严。
4)纯化过的RNA必须保证不含有盐,金属离子,乙醇和苯酚,以上成分会干扰第一链cDNA的合成反应。可采用乙醇沉淀RNA的方法去除掉痕量污染物。
5)为保证反转录反应的有效进行,需使用高质量的RNA模板。
6)实验结果显示,最快逆转录速度可达2kb/min,需要提高反转录效率或模板含量较低时可以适当延长反转录时间。
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