本制品是将PCR反应所需的FastPfu酶、dNTPs、MgCl2、反应缓冲液以及优化剂以及稳定剂,预先配制成2倍浓度的混合物。2×FastPfuMasterMix专为扩增克隆DNA片段优化,高保真,错误率仅为1.3×10-6。使用时只需在加入模板和引物并稀释到1倍浓度即可进行PCR反应,非常方便。较普通Pfu酶,2×FastPfuMasterMix具有快速、高灵敏度、抗干扰强等特点,能获得更理想的扩增结果,并大幅度缩短扩增反应时间,非常适用于1-20kb长片段的扩增。
规格 - HKE035-02A2×FastPfuMasterMix(QuickLoad)
编号 | 产品名称 | 规格 | 产品介绍 | 产品价格 |
HKE035-02A | 2×Fast Pfu Master Mix(Quick Load) | 1ml | 2倍快速Pfu酶预混液 |
HKE035-02A2×FastPfuMasterMix(QuickLoad)的产品特点
高保真:具有同Pfu酶相同的保真度,为普通Taq酶的50倍。
灵敏:可从0.05ng人基因组DNA模板中扩增出特定基因片段。
快速高效:FastPfu扩增速度为普通Pfu酶的数倍,72℃保温30秒可延伸1kb以上,可在较短时间内获得高产量的PCR产物。
快捷:PCR反应所必需试剂全集于一管之中,数分钟即可完成反应体系配制。
HKE035-02A2×FastPfuMasterMix(QuickLoad)的产品用途
用于要求保真度比较高,扩增长度较长的PCR反应,包括克隆PCR、DNA片段拼接、引入突变、全基因合成等。
HKE035-02A2×FastPfuMasterMix(QuickLoad)的使用建议
FastPfuDNA聚合酶产生的PCR产物为平滑末端,无3´端"A"突出,除使用环凯PCR一步定向克隆试剂盒(Cat.No:HKNR001)外,其它PCR产物的克隆方案有:
1)PCR前引物进行5´端加磷修饰或将PCR产物磷酸化处理后再直接克隆于平滑末端的载体中。
2)将产物3´末端加A后再与T载体连接。
3)由于FastPfuDNA聚合酶的校对活性可引起引物从3´端被部分降解。因此在设计引物时应适当增加引物的长度,理想的引物长度为20-30mers。另外为了减少由3´→5´外切酶活性引起的引物降解,尽量在冰上配制反应体系。
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