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HKT002-01BEasyDigestionT-vector(pED-T)

EasyDigestionT-vector是一种PCR产物高效TA克隆的专用T载体,它由pTZ19R载体改造而成。EasyDigestionT-vector在插入位点两端特别设计了两个BamHI位点,使插入片段可以用BamHI单酶切检测及亚克隆,另外还可以使用非常廉价和高效的EcoRI与HindIII双酶切检测及亚克隆。EasyDigestionT-vector保留了pTZ19R载体的所有功能:PCR产物插入后可以利用α-互补性进行蓝白斑筛选,挑选阳性克隆;可以用M13F、M13R通用引物对PCR产物进行测序;含有T7RNA聚合酶的启动子,可以对插入片段进行体外转录。


规格 - HKT002-01BEasyDigestionT-vector(pED-T)

编号产品名称规格产品介绍价格
HKT002-01BEasy Digestion T-vector(pED-T)20次×5T载体2398


  • HKT002-01BEasyDigestionT-vector(pED-T)的操作方法

    1)选择合适的连接体系(详细介绍见背面)。
    2)取10μL加入至100μL感受态细胞中,用移液枪吹打混合,冰上放置30分钟。
    3)将离心管置于42℃水浴中,热击60-90秒,迅速将离心管置于冰上,放置2-3分钟。
    4)向每个离心管中加入500μL无菌不含抗生素的LB或SOC培养基中,37℃摇床,150rpm振荡培养45分钟,使质粒上氨苄抗性基因表达,菌体复苏。
    5)吸取200μL已转化的感受态细胞,加到含氨苄青霉素的LB或SOC固体平板上,用无菌涂布棒将细胞均匀涂开,将平板置于37℃培养箱里直至液体完全吸收,倒置培养12-16小时。
    6)PCR检测,利用试剂盒自带的高速PCR扩增试剂2×FastTaqMastMix直接进行菌落PCR鉴定。