SimpleCloningT-vector(pSC-T)是一种PCR产物高效TA克隆的专用T载体,本载体消除了PCR产物插入区域两侧的多克隆位点。在PCR克隆构建过程中,为了进一步的克隆步骤,常会在PCR产物的两端引入专门的酶切位点,如T载体上已带有相同的酶切位点,会对下一步的酶切连接带来不利的影响。为消除多克隆酶切位点带来的负作用,SimpleCloningT-Vector去除了PCR产物插入区域两侧所有的酶切位点。带有酶切位点的PCR产物克隆后进行酶切时,T载体上不会有相同的酶切位点影响酶切反应,可以大大提高酶切效率,增加亚克隆成功率。多克隆位点的消除并不影响β-半乳糖苷酶的正常表达,PCR产物克隆后仍可以利用α-互补性进行蓝白斑筛选,挑选阳性克隆。由于本载体上消除了多克隆酶切位点,在PCR扩增引物设计时需要考虑导入合适的酶切位点。
规格 - HKT001系列SimpleCloningT-vector(pSC-T)
编号 | 产品名称 | 规格 | 产品介绍 | 价格 |
HKT001-01A | Simple Cloning T-vector(pSC-T) | 20次 | T载体 | 540 |
HKT001-01B | 20次×5 | 2398 |
HKT001系列SimpleCloningT-vector(pSC-T)的产品特点
提供2×快速连接系统(15分钟即可完成连接反应)及10×传统型连接系统(过夜连接可获得最佳连接效果),具体使用说明见后。
HKT001系列SimpleCloningT-vector(pSC-T)的使用建议
1)连接使用的PCR片段3'端应带有A末端,如果是使用pfu等高保真聚合酶扩增的不带A末端的平末端片段,不可直接用于进行连接反应。
2)克隆时使用的InsertDNA片段(PCR产物)建议进行切胶回收纯化,否则PCR产物中的短片段DNA、残留引物等杂质都会影响TA克隆效率。
3)转化过程中建议使用ControlInsertDNA做对照,以便在实验出现问题时确定原因。
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