HKE373-YH01-01ACas12aNuclease

CRISPR/Cas是细菌和古细菌在长期演化过程中形成的一种适应性免疫防御系统。CRISPR相关蛋白Cas9已经广泛应用于基因组编辑，相比于Cas9蛋白，Cas12a具有类似的基因组编辑效率，但具有较低的脱靶效率，在基因治疗应用中具有巨大的潜力。不同于Cas9蛋白，Cas12a不需要tracrRNA，只需要单个由41-44nt核苷酸组成的crRNA引导。这非常有利于基因组编辑，因为Cas12a不仅比Cas9小，而且还具有较小的crRNA分子（接近Cas9的总sgRNA的一半）。与Cas9需要富含G的PAM相反，Cas12a-crRNA复合物通过识别富含T（5'-TTTN-3'）的PAM基序来切割靶DNA。Cas12a执行剪切后的DNA双链断裂引入了4或5个核苷酸突出的粘性末端。这促使Cas12a可以作为一种新型的基因检测和成像的工具。本制品在蛋白两端分别加了核定位信号（NLS），当Cas12a以NLS序列表达时，Cas12a-RNP复合体可以在进入细胞后立即定位到细胞核。无需体内转录或翻译，提高了该方法在质粒系统上的效率。